AAV 载体通常指重组腺相关病毒（rAAV）表达载体，其基本组成主要有：

1.两端 ITR（Inverted Terminal Repeats，反向末端重复序列）

这是 AAV 载体最核心的元件

位于目的表达盒两端

是病毒基因组复制、包装所必需的顺式作用元件

在重组 AAV 中，通常保留 ITR，而去掉病毒自身的大部分基因

2.启动子（Promoter）

用来驱动目的基因表达

可选：

• 广谱启动子：如 CMV、CAG、EF1α
• 组织特异性启动子：如 hSyn（神经元）、GFAP（星形胶质细胞）、TBG（肝脏）

3.目的基因 / 转基因（GOI, Gene of Interest）

即希望导入并表达的基因

例如治疗基因、报告基因（GFP）、Cre、shRNA/sgRNA 等

4.PolyA 信号（多聚腺苷酸化信号）

如 SV40 polyA、bGH polyA

用于终止转录并提高 mRNA 稳定性

常见增强元件（不是绝对必需，但很常见）

5.增强子 / 内含子

提高转录效率和表达水平

例如 WPRE 前常会配合小内含子使用

6.WPRE（Woodchuck Hepatitis Virus Posttranscriptional Regulatory Element）

常用于增强转录后表达效率

可提高转基因表达

7.Kozak 序列

放在起始密码子附近

有助于提高翻译效率

8.标签或连接元件

如 FLAG、HA、His tag

或 2A、IRES，用于双基因共表达

如果从“包装系统”角度看

实验室制备 AAV 时，除了上述转移载体（transfer plasmid）外，还需要另外提供：

Rep/Cap 基因

• Rep：复制相关
• Cap：衣壳蛋白，决定血清型（如 AAV2、AAV9）

辅助病毒功能基因（helper genes）

• 常来自腺病毒辅助质粒

这些通常是包装时提供的元件，不属于最终递送到细胞内的表达盒主体。

一句话总结

最基本的 AAV 表达载体结构可概括为：ITR — 启动子 — 目的基因 — PolyA — ITR